期刊简介

  本刊是医学综合类学术期刊,逢双月26日出版,主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。

        

首页>山西医科大学学报杂志
  • 杂志名称:山西医科大学学报杂志
  • 主管单位:山西省教育厅
  • 主办单位:山西医科大学
  • 国际刊号:1007-6611
  • 国内刊号:14-1216/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录:知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
山西医科大学学报杂志2014年第11期

重组人神经生长因子β基因腺病毒的构建与鉴定

柏宏亮;白转丽;王瑞;何佑成

关键词:人神经生长因子(hNGF), 基因表达, 重组腺病毒
摘要:目的 构建表达人神经生长因子β基因片段的重组腺病毒AdCMV-hNGF-β. 方法 以健康人白细胞中DNA为模板,扩增hNGF-β基因片段,导入pGEM-T-Easy质粒,获得重组质粒pGEM-T/hNGF-β.经酶切鉴定后与复制缺陷型腺病毒穿梭质粒pACCMV-pLpA构建重组腺病毒穿梭质粒pACCMV-hNGF-β.酶切鉴定后再与辅助包装质粒PJM17共转染293细胞,经同源重组后,构建复制缺陷型重组腺病毒AdCMV-hNGF-β.对AdCMV-hNGF-β进行基因鉴定,并测定滴度及在HeLa细胞中的表达. 结果 顺利克隆出hNGF-β基因片段,构建的重组质粒pGEM-T/hNGF-β和重组腺病毒穿梭质粒pACCMV-hNGF-β,经酶切鉴定实际结果与理论推导符合.构建的复制缺陷型重组腺病毒AdCMV-hNGF-β滴度为1.2×1012pfu/ml,并能在HeLa细胞中表达. 结论 以hNGF-β基因片段为基础成功构建了重组腺病毒AdCMV-hNGF-β,测试表明该重组病毒具有高滴度活性和良好的感染人类细胞、表达目的蛋白的能力.