期刊简介

  本刊是医学综合类学术期刊,逢双月26日出版,主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。

        

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  • 杂志名称:山西医科大学学报杂志
  • 主管单位:山西省教育厅
  • 主办单位:山西医科大学
  • 国际刊号:1007-6611
  • 国内刊号:14-1216/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录:知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
山西医科大学学报杂志2015年第05期

长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体的构建及表达

韩稳琦;李国良;程功;吕颖;武金娥;蒋永荣;孙超峰

关键词:遗传性长QT综合征, HERG基因, 基因重组, 蛋白表达
摘要:目的 构建先天性长QT综合征2型HERG基因绿色荧光真核表达载体pEGFP-C2-HERG,并检测其于活体细胞中表达及定位. 方法 采用限制性内切酶双酶切法和基因重组技术将HERG基因片段构建到真核表达载体pEGFP-C2中,通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序验证;构建成功的pEGFP-C2-HERG真核表达载体用脂质体转染法转染HEK293细胞后通过蛋白免疫印迹法再次鉴定重组蛋白的表达,并通过激光共聚焦显微镜观察其荧光蛋白表达及定位. 结果 琼脂糖凝胶电泳证实新构建的真核表达载体pEGFP-C2-HERG碱基大小正确,DNA测序提示HERG基因碱基序列与模板一致,新构建表达载体成功转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达. 结论 成功构建pEGFP-C2-HERG真核表达载体,转染入HEK293细胞并于细胞膜上成功表达通道蛋白;此方法构建的表达绿色荧光的真核表达载体为药物筛查、突变型基因的研究奠定了基础.