期刊简介
本刊是医学综合类学术期刊，逢双月26日出版，主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。
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首页>山西医科大学学报杂志
- 杂志名称：山西医科大学学报杂志
- 主管单位：山西省教育厅
- 主办单位：山西医科大学
- 国际刊号：1007-6611
- 国内刊号：14-1216/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录：知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
基因组不稳定肝细胞CDT1基因过表达和RNAi慢病毒载体的构建
原雅艺；党旭红；张睿凤；张忠新；任越；左雅慧
关键词：CDT1基因, 过表达, RNAi, 慢病毒载体
摘要：目的 构建基因组不稳定细胞CDT1基因过表达和RNAi模型,为进一步探讨该基因在辐射诱发基因组不稳定的功能提供研究工具.方法 根据CDT1基因信息,以慢病毒载体GV218设计合成两种重组质粒,分别包含CDT1基因全长序列以及阴性对照序列;以慢病毒载体GV248设计合成两种重组质粒,分别包含CDT1基因的小干扰序列以及用于干扰对照的阴性序列.利用Western blot和qPCR进行过表达和RNAi重组质粒表达的检测.通过转染293T细胞进行慢病毒的包装.利用ELISA和荧光法分别进行滴度的检测.再用包装好的慢病毒感染辐射诱导基因组不稳定性HL-7702肝细胞,利用qPCR检测CDT1表达量.结果 测序结果表明重组质粒构建成功,并能够有效转染293T.过表达病毒滴度为4.3×108 TU/ml;RNAi病毒滴度为2.0×108 TU/ml.过表达慢病毒能有效上调CDT1的表达,过表达效率为65％.RNAi干扰慢病毒能够有效抑制CDT1的表达,抑制效率为88％.结论 成功构建基因组不稳定肝细胞CDT1基因过表达和RNAi模型,为进一步研究CDT1在辐射诱发基因组不稳定细胞中的功能提供了有效的研究工具.
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