期刊简介

  本刊是医学综合类学术期刊,逢双月26日出版,主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。

        

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  • 杂志名称:山西医科大学学报杂志
  • 主管单位:山西省教育厅
  • 主办单位:山西医科大学
  • 国际刊号:1007-6611
  • 国内刊号:14-1216/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录:知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
山西医科大学学报杂志2016年第09期

绿色荧光蛋白基因与hERG基因G604S突变共表达功能研究

霍建华;马爱群;郭雪艳;强华;刘平;白玲

关键词:增强型绿色荧光蛋白, hERG, G604S突变, HEK293
摘要:目的 观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因与hERG(human ether-a-go-go-related gene)基因融合后是否影响hERG通道的电生理特性. 方法 HEK293细胞分别被转入pcDNA3-WT-hERG和/或pcDNA3-G604S-hERG,pEGFP-WT-hERG和/或pEGFP-G604S-hERG.激光共聚焦观察hERG通道蛋白在细胞内的表达定位;膜片钳实验记录hERG电流. 结果 在转染pcDNA3-WT-hERG或pEGFP-WT-hERG的细胞中,hERG蛋白表达于胞质与胞膜;在转染pcDNA3-G604S-hERG或pEGFP-G604S-hERG的细胞中,hERG蛋白仅在胞质表达.HEK293细胞转染pcDNA3-WT-hERG后,hERG电流的大尾电流密度为(75.4±2.2) pA/pF,明显高于转染pEGFP-WT-hERG的大尾电流密度[(15.1±0.7)pA/pF,P<0.05].共转染pcDNA3-WT-hERG与pcDNA3-G604S-hERG的大hERG尾电流密度明显高于pEGFP-WT-hERG/pEGFP-G604S-hERG的大hERG尾电流密度[(23.1±0.8)pA/pF vs(12.6±0.9) pA/pF,P<0.05].此外,EGFP基因与野生型或突变hERG基因融合后,明显改变了hERG通道的电压依赖性激活及去失活特性. 结论 EGFP基因与野生型或突变hERG基因融合不影响hERG通道蛋白在细胞内的表达定位,但明显改变了hERG电流的大小、激活及去失活特性,因此检测突变hERG通道的电生理功能时应避免使用绿色荧光蛋白基因质粒作为表达载体.