期刊简介
本刊是医学综合类学术期刊，逢双月26日出版，主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。
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首页>山西医科大学学报杂志
- 杂志名称：山西医科大学学报杂志
- 主管单位：山西省教育厅
- 主办单位：山西医科大学
- 国际刊号：1007-6611
- 国内刊号：14-1216/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录：知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
S100A6基因过表达慢病毒载体的构建、转染及鉴定
李洁；胡进；马力天；叶欣；南岩东；吴大方
关键词：慢病毒载体, A549细胞, S100A6基因
摘要：目的 构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达. 方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体pLenO-DCE定向连接,转化E.Coli DH5α感受态细胞,对阳性重组子进行DNA测序及比对.将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞生产病毒液,荧光显微镜观察报告基因在293T细胞中的荧光表达,判断重组慢病毒的感染效率.用得到的病毒液转染人肺腺癌A549细胞,real-time PCR和Western blot检测转染A549细胞后S100A6蛋白和S100A6 mRNA的表达. 结果 测序提示重组慢病毒质粒构建成功;荧光显微镜观察显示在包装细胞中获得较高的转染效率.real-time PCR检测显示A549细胞中有S100A6 mRNA表达;Western blot显示S100A6蛋白在A549细胞中稳定表达. 结论 成功构建S100A6基因慢病毒表达载体,并成功感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达,为S100A6基因功能及特性的研究和探索提供了实验基础.
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