期刊简介

  本刊是医学综合类学术期刊,逢双月26日出版,主要刊登我校科技人员及校友在基础医学、预防医学、药学、临床医学等方面的科研成果及经验报告和综述等。

        

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  • 杂志名称:山西医科大学学报杂志
  • 主管单位:山西省教育厅
  • 主办单位:山西医科大学
  • 国际刊号:1007-6611
  • 国内刊号:14-1216/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国科技类核心期刊 中国科技论文统计源期刊期刊收录:知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 维普收录(中)
山西医科大学学报杂志2017年第08期

siRNA沉默AT2受体通过Ang(1-9)-ACE2-AT2通路抑制心脏微血管内皮细胞NO的生成

张岩;李永勤;王聪霞;张春艳;胡艳超;寇惠娟;马维冬;刘晓唤

关键词:siRNA, AT2受体, 重组人血管紧张素转化酶2, Ang(1-9)-ACE2-AT2通路, 微血管内皮细胞
摘要:目的 研究重组人血管紧张素转化酶2(rhAC E2)作用于心脏微血管内皮细胞后对NO产生的影响,采用siRNA沉默AT2受体研究Ang(1-9)-ACE2-AT2通路在这一过程中的作用.方法 体外培养人心脏微血管内皮细胞(CMVEC),分为对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+rhACE2组、AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组.Griess试剂法测定细胞培养上清液中NO的含量,RT-PCR检测HUVEC中eNOS mRNA的表达,检测细胞内NO的生成及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性.Western blot检测磷酸化eNOS的表达.观察rhACE2对Ang Ⅱ作用后CMVEC生成NO、eNOS mRNA、eNOS蛋白表达的影响,同时观察加用AT2受体抑制剂PD123319干预后,rhACE2对磷酸化eNOS蛋白表达的影响.观察siRNA干扰CMVEC中AT2受体蛋白后对eNOS活性、NO的影响.结果 Ang Ⅱ组NO的含量[(3.495±0.362)nmol/L]明显低于对照组[(11.513 ±0.392)nmol/L,P<0.05];Ang Ⅱ+rhACE2组细胞培养液中NO的含量和磷酸化eNOS表达水平均明显高于Ang Ⅱ组(P<0.05),而eNOS mR-NA和非磷酸化eNOS蛋白表达水平与Ang Ⅱ组相比无统计学差异(P>0.05).经AT2通路抑制剂PD123319干预后的AT2受体抑制剂组磷酸化eNOS表达水平明显低于Ang Ⅱ+rhACE2 30 min组(P<0.05).Western blot检测结果显示转染AT2siRNA组转染48 h AT2受体蛋白表达降低(P<0.05);与AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组相比,转染AT2 siRNA组的eNOS活性和NO含量均显著降低.结论 rhACE2作用于人心脏微血管内皮细胞后,eNOS活性增强,NO生成增加,Ang(1-9)-ACE2-AT2信号通路参与这一过程.